切腹自杀，亦称剖腹自杀，是日本武士的一种自杀方法。日本武士为什么要用切腹之法来自杀？为什么不用其他方法？
切腹，为以刀切开腹部的自杀仪式，一般认为源自日本。
切腹自杀者日语称为“切腹人”，而切腹人如为了追随师父死亡而自杀，过程称为“追腹”。剖腹后由于未必会即时死亡，剖腹自杀者为了减轻激烈的痛楚，可能会于剖腹后进行介错，即找来助手在最痛苦一刻替其斩首。
介错是和日本武士切腹自杀有关的词语。由于切腹的过程太过痛苦，故很多时切腹者也会找来介错，就是把切腹者的头斩下来以减轻切腹所带来的长久痛苦，而到了后来很多时只是象征性把刀碰到腹部而不需要造成致命伤口就被斩首了。
日本的切腹自杀最早见于史书的为12世纪末期室町时代的贵族源义经。他由于同父异母执政兄长源赖朝妒嫉他的才能，前后追捕他达8年，因无地容身，才切腹自杀。
16世纪车臣秀吉的外甥秀次，因居高位，态度傲慢，最后被赐切腹自杀。切腹故事中最使日本人入迷而疯狂的，是18世纪赤穗47武士的故事。这47个武士为了替主人报仇，事成后，全体被赐切腹自杀。
剖腹的开始盛行，是在镰仓幕府以后，因丢失阵地而引咎剖腹，或耻于被擒而阵前剖腹，占了绝大多数，一直持续到战国时代。江户开幕以后，社会统治相对平稳，因殉死而剖腹，和作为刑罚的“诘腹”，逐渐占了主流。
至于为什么选择剖腹作为武士最崇高的死亡方式，现在普遍认为，古代许多的国家和民族，均主张人的灵魂是宿于肚腹中的；因此，武士便在有必要将自己的灵魂向外展示的时候，采取剖腹以示众人的方法和仪式。
剖腹是日本平安时代以后才广泛流传的自杀方法，一般认为源为朝是最初进行剖腹的人。日本封建时期武士如被主君赐死，相比起纯粹的斩首，剖腹被视为最光荣的死法。剖腹到江户时代才得以形成过程洗链、并进行介错辅助的复杂仪式。
剖腹者并没有介错人协助，会直接于腹部割开十字形状，内脏爆裂流出，直至失血过多死亡。这种剖腹方法称为「十文字切」。现代医学一般认为刀锋到达内脏时，剖腹者会已失去知觉。最后使用十文字切方式自杀的，是1912年的乃木希典上将。
一般附有介错人帮助的剖腹仪式过程如下：剖腹自杀者穿着庄重服装，用来剖腹的刀或剑放在他正前方。刀可能用特别的布料垫着。武士会作死亡的心理准备，例如写作称为辞世之句的诗歌。待他和身旁的介错人助手准备好，剖腹者会揭开身穿的和服，拿起刀剑，捅进自己腹部。剖腹者首先从左至右的切割，然后作稍微向上移动。
亦有一些切腹者会以扇子或木刀来代替切腹用的小刀，作为形式上的切腹，实际上是由介错人下刀杀死切腹者。此种切腹方式被称为扇子切。介错人一般是剖腹自杀者的亲友。武士如果战败但输得光荣，对手可能会为了向其勇气致敬，而自愿担当介错人。
据说日本武士切腹自杀，跟鲤鱼有关。日本古代常拿鲤鱼来比武士。他们认为，鲤鱼若受了刀伤，能坚毅忍受，直到死去一动也不动。日本人喜吃活生生一刀杀死的鲤鱼，一面却对鲤鱼有好感。切腹自杀正是受了鲤鱼这种强毅不屈的“精神”的影响。