乌兹别克族人信奉伊斯兰教，属其中的逊尼派。塔吉克、哈萨克、吉尔吉斯、阿塞拜疆、鞑靼、维吾尔族人等也信奉伊斯兰教，伊斯兰教信徒占人口总数90％以上，属政教分离的穆斯林国家。
除逊尼派以外，乌还有什叶派、苏菲派、瓦哈比派等15个宗教派别和非传统教派。乌穆斯林、礼拜场和宗教学校的数量在中亚五国中居首位，正式登记的清真寺有2000座。乌兹别克人的伊斯兰信仰在中亚穆斯林人口中素有正统和保守的名声，而费尔干纳地区、撒马尔罕和布哈拉又一直是中亚的宗教中心，所以乌兹别克斯坦被认为是中亚的伊斯兰教中心。
在乌的朝鲜族人多信奉佛教和基督教，俄罗斯人信奉东正教。乌现有东正教教堂近30座，基督教教堂40多座。
乌兹别克人信仰伊斯兰教，多食牛、羊、马肉和奶制品。喜欢吃抓饭、烤肉串。日常饮食离不开馕(一种烤制的发面饼)和茶，吃馕时把它分成数块，馕心不能向下放。有时用切碎的熟肉和葱头、酸奶加以搅拌，再加肉汁、胡椒调味，是本民族风味食品。各种烤肉串、烤包子等传统小吃在街头几乎随处可见。
乌兹别克的手抓饭是用肉汤、大米、胡萝卜、葡萄干及当地特有的一种豆子精心闷制2、3小时而成，再拌上羊尾油和切成小块的熟肉，撒上切碎的绿色时蔬，营养丰富，色香味美，别具风味。乌兹别克人对手抓饭情有独钟，是过节、待客时最重要的民族食品，每个家庭都有专做抓饭的厚重铁锅。在婚丧嫁娶、婴儿出生或举行其它庆祝活动时，所有参加活动的男士都要在早上五点左右、太阳升起前到主人家里或聚会地点去吃手抓饭，而这项仪式一般却不允许女人参加。在宴请尊贵的客人时，手抓饭更是必不可少的待客佳肴，通常要等到最后一道菜上完，才端上饭桌。
乌兹别克的主要传统节日是伊斯兰教的开斋节、古尔邦节和乌兹别克自己的农历新年(纳弗鲁斯节)。开斋节是伊斯兰教的三大节日之一，也是乌兹别克人的一个盛大的传统宗教节日。斋月的起止日期是按照古兰经制定的规则、由伊斯兰教学者观察月亮的圆缺变化每年确定一次。一般下一年度的斋月要比今年的提前10天左右。斋月期间，太阳升起后到落山以前不能进食。斋月过后的3天为开斋节，在这三天里人们可以尽情享受各种美味佳肴。
古尔邦节是在开斋节过后的第70天。在这一天一定要杀一头羊，还有不少虔诚的乌兹别克人在这一天到麦加朝圣。纳弗鲁斯节为每年的3月21日。"纳弗鲁斯"在乌兹别克语中是"春天"的意思，类似于中国的春节，是乌兹别克斯坦的第一大节日。节日期间，人们走亲访友，举行宴请，到广场和公园游玩。人们还在户外挖坑埋锅，做抓饭和民族传统饮食，分给邻居和亲朋好友。过节时还要喝一种加油和糖的麦芽粥。各种庆祝活动可以持续一个月左右。
乌兹别克的传统民族服装是刺绣精美的小帽和五颜六色的长袍。婚礼上的新郎、新娘一般要穿上传统的民族服装。一顶手工制作的小帽和一件精心缝制的棉袍通常是乌兹别克人送给重要来宾的贵重礼物。